信帆生物為大家分享：外源性ELISA結(jié)果出錯解決方案
更新時間：2016-07-07 點擊次數(shù)：1114次信帆生物為大家分享：外源性ELISA結(jié)果出錯解決方案:
外源性物質(zhì)干擾解決方案：
外源性物質(zhì)常常是由于用于 ELISA 測定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。
（1）標(biāo)本溶血 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的 ELISA 測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用，標(biāo)本采集時必須注意避免溶血。
（2）標(biāo)本受細(xì)菌污染 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果（信帆生物）。
（3）標(biāo)本保存不當(dāng) 在冰箱中保存過久的標(biāo)本，血清中 IgG 可聚合成多聚體、AFP 可形成二聚體，在間接法 ELISA 測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性；標(biāo)本放置時間過長（如一天以上），有時抗原或抗體免疫活性減弱，亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾，ELISA 測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于 4℃，1 周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔，（上海信帆生物）不可強烈振蕩。
（4）標(biāo)本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下，正常血液采集后 1/2~2 h 開始凝固，18~24 h *凝固。上海信帆生物提供ELISA樣本收集方法。檢驗工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在 ELISA 測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；這類情況于次日復(fù)查時因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用，解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>
（5）標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如 NaN3 可抑制 ELISA 系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性）及快速分離血清的分離膠等均對 ELISA 測定有一定干擾作用。 綜上所述，對檢驗 ELISA 測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果，在考慮試劑因素和操作因素之外，更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析，并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除 干擾作用，從而為提供正確可靠的檢測結(jié)果。
上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：進(jìn)口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清：胎牛血清,人血清,動物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。
生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對照品：進(jìn)口對照品,進(jìn)口對照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體：一抗,二抗，流式抗體等。
放免試劑盒：進(jìn)口放免試劑盒，國產(chǎn)放免試劑盒，進(jìn)口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務(wù)：放免代測，WB實驗，免疫組化代測，熒光定量PCR代測，病理細(xì)胞染色代測，生化實驗代測等。
