乙醇酸氧化酶（GO）提取液的實(shí)驗(yàn)方法及注意事項(xiàng)
更新時(shí)間：2019-05-06 點(diǎn)擊次數(shù)：2274次 乙醇酸氧化酶(Glycolate oxidase，GO)是乙醇酸循環(huán)的一種酶，在乙醇酸代謝循環(huán)中乙醇酸通過(guò)乙醇酸氧化酶的作用而變成乙醛酸。光合作用與呼吸作用是植物代謝的兩大核心內(nèi)容，前者是物質(zhì)合成與能量?jī)?chǔ)存過(guò)程，屬于同化作用，為包括人來(lái)在內(nèi)的幾乎所有生物的生存提供物質(zhì)來(lái)源和能量來(lái)源；后者是物質(zhì)分解與能量釋放過(guò)程，屬于異化作用，為生命提供能量。通過(guò)測(cè)定樣品中乙醇酸氧化酶活性，了解植物的光合和呼吸代謝的基本方法。
乙醇酸氧化酶(GO)提取液主要用于提取植物組織或果實(shí)中乙醇酸氧化酶。該試盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考)：
1、取新鮮植物葉片，清洗干凈，吸水紙吸干，加入預(yù)冷的GO Lysis buffer，冰浴情況下充分勻漿或研磨，經(jīng)紗布或?yàn)V紙過(guò)濾，將濾液置于離心管或試管。
2、離心，取上清液置于新的離心管或試管，調(diào)節(jié)pH 值,離心，取上清液。
3、不斷混勻，離心，取上清液。
4、不斷混勻，離心，棄上清液，留取沉淀即為乙醇酸氧化酶粗制品。
5、加入適量的GO懸浮液溶解沉淀，使其體積為開(kāi)始提取液體積的1/10，即為乙醇酸氧化酶粗提液，保存待用?？煽紤]采用BCA蛋白定量法等檢測(cè)乙醇酸氧化酶粗提液中蛋白質(zhì)的濃度。
注意事項(xiàng)：
1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于-20~-80℃。
2、如果沒(méi)有分光光度計(jì)，也可以使用普通的酶標(biāo)儀測(cè)定，但應(yīng)考慮酶標(biāo)儀的大檢測(cè)體
積。
3、所測(cè)樣本的濃度過(guò)高，應(yīng)用乙醇酸氧化酶(GO)提取液稀釋樣品后重新測(cè)定。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期：12個(gè)月有效
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