天青石藍(lán)B染色液的說明介紹
更新時間:2019-05-15 點(diǎn)擊次數(shù):1321次 蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE 染色,是病理學(xué)和組織學(xué)常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易
與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。
單純的明礬蘇木素細(xì)胞核染色后的缺點(diǎn)是對隨后的酸性染料比較敏感,Van Gieson 染色時使用的酸可脫掉大部分蘇木素的顏色,以致細(xì)胞核幾乎看不到,在這種情況下使用鐵蘇木素或天青石藍(lán)可抵抗酸的影響而達(dá)到滿意效果。
天青石藍(lán) B 染色液主要由 0.5%天青石藍(lán) B 組成,多與明礬蘇木素聯(lián)合使用,其優(yōu)勢在于天青石藍(lán) B 能抗酸,且高鐵鹽可加強(qiáng)明礬蘇木素與細(xì)胞核的結(jié)合力,使細(xì)胞核染色更深,因此可以達(dá)到抗酸的目的,使蘇木素的顏色不易褪去。
操作步驟(僅供參考):
1、 石蠟切片脫蠟,梯度乙醇水化至水。
2、 入天青石藍(lán) B 染色液浸染 2-5min。
3、 蒸餾水沖洗,按要求繼續(xù)進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1、 隨著染色液放置時間的延長,染色力會有所下降,染色時間也需延長。
2、 染液的使用程度越強(qiáng),染色力下降越快,染色時間也就越長。
3、 冰凍切片的染色時間應(yīng)縮短,在無緩沖液的福爾馬林溶液浸泡時間較長的組織及脫鈣組織染色時間應(yīng)延長。
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