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人促黃體生成激素放免試劑盒，LH放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)

碘[¹²⁵I]人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)

【藥品名稱】

通用名：碘[¹²⁵I]人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒

英文名：Iodine [¹²⁵I] Human Luteiniziing Hormone Radioimmunoassay Kit

漢語(yǔ)拼音：Dian[¹²⁵I] Rencuhuangtishengchengjisu Fangshemianyifenxi Yaohe

【成分】

【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清，無(wú)沉淀或絮狀物；凍干組分應(yīng)呈疏松狀，復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[¹²⁵I]，其物理半衰期(T1/2)為60天。

【意義】

LH由垂體前葉嗜堿細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素，其蛋白部分由204個(gè)氨基酸構(gòu)成α和β兩個(gè)亞基，α亞基與FSH、TSH和HCG相同，只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu)，兩者通過(guò)非共價(jià)鍵連接，分子量約為30KD。LH和FSH都呈脈沖式分泌，故有較明顯的日內(nèi)和日間變異。女性月jin中期的LH高峰促成排卵；男性LH主要刺激wan間質(zhì)細(xì)胞分泌wan酮，又協(xié)同F(xiàn)SH促進(jìn)精zi成熟。LH的測(cè)定在預(yù)測(cè)排卵，診斷不孕癥，研究和判斷下丘腦-垂體-性腺軸功能及有關(guān)內(nèi)分泌疾病的治療監(jiān)測(cè)等方面有重要意義。對(duì)作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避yun藥的藥理研究也有很大價(jià)值。

本藥盒采用放射免疫分析方法，測(cè)定人血清中的LH含量。

【測(cè)定原理】

應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制原理，標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的LH和加入的¹²⁵I-LH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫反應(yīng)。¹²⁵I-LH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中LH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離劑（PR）將結(jié)合部分（B）與游離部分（F）分離后，測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度，并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B₀。用已知標(biāo)準(zhǔn)LH含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖，即得標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中LH的含量。

【適用儀器】適用于各類γ-放射免疫分析儀。

【樣本要求】

取靜脈血分離血清，待測(cè)；如不當(dāng)天測(cè)量，可將樣品密封后，置于2~8℃或-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè)，2~8℃保存不應(yīng)超過(guò)1周，-20℃保存不超過(guò)2個(gè)月。

【用法用量】

1 試劑配制、使用方法和保存

• LH標(biāo)準(zhǔn)品：液體，直接使用。濃度分別為0、5、10、25、50、100、200mIU/ml。2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定，未開(kāi)封標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存在標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• ¹²⁵I-LH：凍干品，100管用10ml蒸餾水溶解，50管用5ml蒸餾水溶解，如一次加樣超過(guò)100管，兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi)。2~8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 兔抗-LH抗體：凍干品，用蒸餾水溶解，溶解方法見(jiàn)封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí)，兩瓶溶解后混合使用?？贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 驢抗兔免疫分離劑：液體，直接使用。加樣前充分搖勻！2~8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后2~8℃保存45天內(nèi)穩(wěn)定。若加樣超過(guò)100管，兩瓶混合后搖勻。
• LH質(zhì)控血清：使用方法，保存條件，有效期及附值，詳見(jiàn)質(zhì)控血清使用說(shuō)明書(shū)。

人促黃體生成激素放免試劑盒，LH放免實(shí)驗(yàn)代測(cè)

2測(cè)定步驟

取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S₀-S₅和待測(cè)樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑！）包括待測(cè)樣品要搖勻，并且平衡到室溫。

操作程序表                              單位：μl

3數(shù)據(jù)處理

• 聯(lián)機(jī)處理: 由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
• 手工作圖或計(jì)算器處理:
  •  百分結(jié)合率計(jì)算：設(shè)S₀管計(jì)數(shù)為B₀，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B，非特異管計(jì)數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計(jì)算公式為

B/ B₀=(B－NSB)/( B₀－NSB)×100%

3.2.2 logit計(jì)算：各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為

logit=ln[(B/ B₀)/(1－B/ B₀)]

3.2.3 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的B/B₀為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時(shí)是一條直線）。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B₀可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是zui后的濃度值。

3.2.4計(jì)算器處理：使用有線性擬合功能的計(jì)算器，可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值，具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。

3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實(shí)際計(jì)算）。濃度單位mIU/ml

【參考正常值】

正常人血清參考值：

男性：5~30 mIU/ml

女性：6~217 mIU/ml

濾泡期：2~30 mIU/ml

黃體期：0~20 mIU/ml

排卵高峰：40~200mIU/ml

由于地區(qū)及使用儀器不同，所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異，所以本說(shuō)明書(shū)提供的正常值僅作參考。各實(shí)驗(yàn)室能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

• 標(biāo)準(zhǔn)范圍：5~200mIU/ml
• 靈敏度：~1.0mIU/ml
• 精密度：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<10%；批間變異系數(shù)（CV）<15%。
• 使用期限：見(jiàn)產(chǎn)品外包裝。

【禁忌】本品僅供體外診斷用!
【注意事項(xiàng)】

• 收到藥盒后，盡快存放在2~8℃。
• 使用前請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀此說(shuō)明書(shū)。
• 吸棄上清液時(shí)，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測(cè)定結(jié)果。
• 不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
• 藥盒請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。
• 標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。
• 使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù)，放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。
• 使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。

【貯藏】2～8℃保存。

【有效期】1個(gè)月。

抗體溶解方法：

兔抗-LH抗體：用蒸餾水溶解， 100管產(chǎn)品每瓶抗體加     ml，50管產(chǎn)品抗體每瓶加       ml（如不填寫(xiě)，50管藥盒用5ml溶解，100管藥盒用10ml溶解，若為液體抗體請(qǐng)直接使用）。

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