FT3放免試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),游離三碘甲腺原氨酸放免試劑盒
更新時間:2016-07-06 點(diǎn)擊次數(shù):1358次上海信帆生物銷售FT3放免試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),游離三碘甲腺原氨酸放免試劑盒,咨詢!
通用名:碘[125I]游離三碘甲腺原氨酸放射免疫分析藥盒
漢語拼音:Dian [125I] Youli Sandianjiaxianyuan’ansuan
Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名:Iodine [125I] Free Triiodthyronine Radioimmunoassay Kit
簡稱:碘[125I]- FT3 放免藥盒
[使用目的]
用于人血清樣本中游離三碘甲腺原氨酸(FT3)的定量測定
[試驗原理]
人體血液中三碘甲腺原氨酸T3 和素T4 的絕大部分與結(jié)合球蛋白和白蛋白結(jié)合
進(jìn)行循環(huán),但結(jié)合部分的激素沒有生物活性,真正具有生物活性的只是極小部分游離激素,
即占總?cè)饧紫僭彼酺T30.3%的游離三碘甲腺原氨酸FT3 和占總素TT40.03%的游
離素FT4。所以血清中FT3 和FT4 濃度更能反映功能狀態(tài)水平。
本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含游離三碘甲腺原氨酸
(Free Triiodthyronine)的樣品和125I 標(biāo)記的游離三碘甲腺原氨酸(FT3)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成
抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數(shù)。
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中FT3 的濃度。
[試劑主要組成成分]
1.FT3 標(biāo)準(zhǔn)品
一套共7 瓶,以不含T3 的人血清為基質(zhì)配制,用時輕輕搖勻。-20℃凍存(2-8℃保存六
周)。
FT3 標(biāo)準(zhǔn)品濃度
2.質(zhì)控血清:三瓶,0.5 ml/瓶,-20℃凍存(2-8℃保存六周)。
3.抗FT3 血清:綠色溶液,需2-8℃冷存。
4.125I-FT3 標(biāo)記物: 紅色溶液,需2-8℃冷存。
5.分離劑:綠色溶液,充分搖勻后使用,需2-8℃冷存。
[儀器]
1、γ-計數(shù)器
2、低溫離心機(jī)
3、恒溫水浴箱
[樣本要求]
A B C D E F G 單位
0 0.7 3.60 7.20 18.1 34.0 64.0 pmol/L
110 微升人血清樣本。
采靜脈血5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉(zhuǎn)/分離心,取其上清液,放置玻
璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲存6 個月。
嚴(yán)重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結(jié)果有影響。
[實驗方法]
1、將實驗所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少30 分鐘以上才可進(jìn)行操作;
2、取60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號,所有實驗均做雙管重復(fù);
3、取每個濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本50μl 加入相應(yīng)編號的試管中;
4、每管均各加入100μl 標(biāo)記物工作液;
5、除T、NSB 管外,每管均各加入100μl 抗體工作液,充分混勻;
6、37℃溫育1 小時;
7、每管均各加入500μl 分離劑后,充分混勻,室溫放置10~15 分鐘;
8、離心3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、用γ-計數(shù)器測定每管1 分鐘的放射性強(qiáng)度計數(shù);
10、從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
[操作流程]
(單位:μL)
T
NSB 標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控&樣品
A(B0) B C D E F G 質(zhì)控樣品….
標(biāo)準(zhǔn)品
A 50 50
標(biāo)準(zhǔn)品
B-G 50 50 50 50 50 50
質(zhì)控&樣品50 50
125I-FT3
抗FT3 血清
混勻,置37℃水浴溫育1 小時
分離劑500
搖勻,室溫放置10-15 分鐘,3000RPM 離心20 分鐘(溫度低于25℃)
吸去上清液
沉淀物計數(shù)1 分鐘
[實驗過程中應(yīng)注意]
1、γ-計數(shù)器本底計數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%;
100
100
2、加入放射性標(biāo)記物時,應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,以避免造成放射性污染;
3、如果某一個樣本的測定值高于zui高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,用零標(biāo)準(zhǔn)品以1:2 或1:
4 的比例稀釋樣本后重新測試,測試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
[質(zhì)量控制]
每次實驗操作應(yīng)至少采用兩個濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保每次實驗測定結(jié)果
的可靠性。
1、質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi);
2、曲線方程應(yīng)采用適合擬合方式;
3、重復(fù)樣本的測定結(jié)果相差在15%以內(nèi)。
如不能同時滿足以上條件,則此次試驗結(jié)果無效,全部試驗需重新進(jìn)行。
[測定結(jié)果的計算]
1、計算標(biāo)準(zhǔn)品(B~G)、質(zhì)控品和樣品與標(biāo)準(zhǔn)品A 的比值(B/B0);
2、劑量-反應(yīng)曲線按“對數(shù)劑量-結(jié)合率對數(shù)”(Log(dose-Log(B/Bmax))數(shù)學(xué)模型或
四參數(shù)數(shù)學(xué)模型擬合,通過每個標(biāo)準(zhǔn)品的B/B0 和其濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線;
3、從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣本的濃度值,B/B0 不在標(biāo)準(zhǔn)曲線之內(nèi)的樣本及其濃度
[實驗的局限性]
1、本品僅供體外診斷使用,只能用于人血清樣本的測定而不能用于其他體液樣本;
2、通過其它方法得到的FT3 值與本品測定結(jié)果不具有直接的可比性;
[產(chǎn)品性能指標(biāo)]
1、靈敏度:
取藥盒中校準(zhǔn)試劑A 點(diǎn)(0 劑量)作20 平行管,求其均值X 及偏差SD,從劑量—反應(yīng)
曲線上查出與X+2SD 相對應(yīng)的劑量值,確定為本藥盒的靈敏度(zui小檢出值),為
0.07pmol/L。
2、精密度:
精密度是質(zhì)量控制的基本參數(shù),用批內(nèi)變異系數(shù)和批間變異系數(shù)確定。要求批內(nèi)變異系
數(shù)< 10% ,批間變異系數(shù)< 15% 。
批內(nèi)變異系數(shù):指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 同時分別進(jìn)行多個復(fù)管一次測定中
的重復(fù)性,應(yīng)小于10%。
B/B0×100 = 標(biāo)準(zhǔn)或樣品(STD or Samples)(CPM)—NSB(CPM)
A 標(biāo)準(zhǔn)(STD)(CPM)—NSB(CPM)
×100
C1 C2 C3
批內(nèi)變異系數(shù)2.76% 3.14% 6.47%
批內(nèi)變異系數(shù)均小于10%。
批間變異系數(shù):指不同濃度的三個樣品C1、C2、C3 在多次測定間的重復(fù)性,應(yīng)小于15%。
C1 C2 C3
批間變異系數(shù)3.66% 2.35% 4.79%
批間變異系數(shù)均小于15%。
3、測定范圍:
采用零標(biāo)準(zhǔn)品添加高濃度的FT3,確定本試劑盒的測定范圍為0 ~ 64.0pmol/L
[注意事項]
1、全部試劑應(yīng)避光貯于2-8℃并在使用前應(yīng)在室溫下(17-27℃)平衡。
2、該產(chǎn)品在制備過程中所用的血清均經(jīng)檢測,他們對HBsAg、HIV 無反應(yīng)。但即使這樣也
不會保證對所有的傳染性因素進(jìn)行檢測。由于沒有一個明確的測試方法能*保證不會出現(xiàn)
HBsAg、HIV 或其他傳染病毒,所以所有的產(chǎn)品包括來自人體的物質(zhì)都應(yīng)按良好的實驗室規(guī)
范,按疾病預(yù)防和控制中心的有關(guān)規(guī)定要求進(jìn)行預(yù)防。
3、樣本濃度過高,在分析前用保溫液稀釋,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
4、單位換算:pg/ml=pmol/L×0.651
5、血清正常值,僅供參考,使用單位應(yīng)建立自己實驗室的正常值。
正常血清參考值2.91~9.08pmol/L
[規(guī)格] 50 人份/盒、100 人份/盒
[儲藏]冷凍組份-20℃,冷藏組份2~8℃。
[有效期] 1 個月