信帆生物教你如何去除內(nèi)毒素
更新時(shí)間：2016-12-23 點(diǎn)擊次數(shù)：1072次內(nèi)毒素對生物應(yīng)用的影響
內(nèi)毒素強(qiáng)烈影響DNA轉(zhuǎn)染到原代細(xì)胞和敏感的培養(yǎng)細(xì)胞中，并且增加的內(nèi)毒素水平導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率急劇降低。此外，使用不含內(nèi)毒素的質(zhì)粒DNA用于基因治療是極其重要的，因?yàn)閮?nèi)毒素可引起動物和人發(fā)燒、內(nèi)毒素性休克綜合征和補(bǔ)體級聯(lián)的活化。內(nèi)毒素還通過激活非特異性免疫應(yīng)答，干擾體外轉(zhuǎn)染到巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞等免疫細(xì)胞中。這些反應(yīng)包括免疫介質(zhì)如IL-1和前列腺素的誘導(dǎo)合成。確保塑料制品、培養(yǎng)基、血清和質(zhì)粒DNA沒有LPS污染，避免誤導(dǎo)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
內(nèi)毒素測定方法
經(jīng)典的內(nèi)毒素測定基于內(nèi)毒素與鱟變形細(xì)胞中的可凝結(jié)蛋白之間的凝血反應(yīng)?，F(xiàn)在可使用更靈敏的光度測定（例如，來自BioWhittaker,Inc的Kinetic-QCL Test），其基于鱟變形細(xì)胞溶胞產(chǎn)物（LAL）和合成的產(chǎn)生顏色的底物。LPS污染通常以內(nèi)毒素單位（EU）表示。通，1ng LPS對應(yīng)于1-10EU。
內(nèi)毒素去除
如今，內(nèi)毒素的去除都會使用商業(yè)化的試劑盒。一般利用多粘菌素B（polymixin B ）連接到瓊脂糖微球上，進(jìn)行特異性去除內(nèi)毒素。多粘菌素B可通過靜電作用、離子作用、親水作用和分子之間的相互作用等多種因素吸附內(nèi)毒素，從而達(dá)到內(nèi)毒素去除的目的。
在內(nèi)毒素去除過程中，我們要切記使用不含內(nèi)毒素的塑料制品和玻璃器皿。為了避免在初始內(nèi)毒素去除后對質(zhì)粒DNA的再污染，建議僅使用經(jīng)認(rèn)證無熱原或無內(nèi)毒素的新塑料制品。無內(nèi)毒素或無熱原的塑料制品可以從許多不同的供應(yīng)商處獲得。內(nèi)毒素強(qiáng)烈粘附于玻璃器皿，并且在洗滌期間難以*除去。標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室高壓滅菌方法對內(nèi)毒素水平幾乎沒有或沒有影響。此外，如果高壓鍋先前已用于細(xì)菌，則玻璃器皿將被內(nèi)毒素分子廣泛污染。180°C過夜加熱玻璃器皿可破壞任何附加的內(nèi)毒素分子。重要的是不要通過使用含內(nèi)毒素的試劑純化無內(nèi)毒素DNA，所有緩沖液都需要無內(nèi)毒素。
上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：進(jìn)口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清：胎牛血清,人血清,動物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。
生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對照品：進(jìn)口對照品,進(jìn)口對照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體：一抗,二抗，流式抗體等。
放免試劑盒：進(jìn)口放免試劑盒，國產(chǎn)放免試劑盒，進(jìn)口美國鳳凰等放免試劑盒。
實(shí)驗(yàn)室代測服務(wù)：放免代測，WB實(shí)驗(yàn)，免疫組化代測，熒光定量PCR代測，病理細(xì)胞染色代測，生化實(shí)驗(yàn)代測等。
