大鼠纖維連接蛋白（FN）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
更新時(shí)間：2017-04-21 點(diǎn)擊次數(shù)：884次大鼠纖維連接蛋白(FN)elisa試劑盒基本信息簡(jiǎn)介
纖維粘連蛋白（fibronectin,FN)，又稱纖粘蛋白，屬非膠原糖蛋白的一種， 是一種冷不溶球蛋白,廣泛存在于動(dòng)物界， 包括海綿、海膽及哺乳動(dòng)物類。在脊椎動(dòng)物中, 纖粘連蛋白以可溶的形式存在于血漿和各種體液中，稱為血漿纖維粘連蛋白；以不溶的纖維存在于細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞之間及某些細(xì)胞表面, 稱為細(xì)胞粘連蛋白。
FN是高相對(duì)分子質(zhì)量的粘附性的糖蛋白， 含糖約5%。FN由兩個(gè)亞基組成的二聚體，每個(gè)亞基的相對(duì)分子質(zhì)量約250kDa, 各亞基在C末端形成兩個(gè)二硫鍵交聯(lián)。血漿FN是二聚體， 由兩條相似的A鏈和B鏈組成, 整個(gè)分子成V形。細(xì)胞FN是多聚體，其不同來(lái)源的FN亞基結(jié)構(gòu)相似, 但并不相同。不同的亞單位均為同一基因的表達(dá)產(chǎn)物， 只是轉(zhuǎn)錄后在RNA的剪接上有所不同,因而產(chǎn)生不同的mRNA。另外， 在翻譯后的修飾上也有差異，F(xiàn)N的每個(gè)亞單位的蛋白組成若干個(gè)球形結(jié)構(gòu)域, 各結(jié)構(gòu)域之間由對(duì)胰蛋白酶敏感的肽鏈連接，因此可通過(guò)胰蛋白酶的水解作用分離這些結(jié)構(gòu)域研究它們的功能。每個(gè)FN亞基上有與膠原、細(xì)胞表面受體、血纖蛋白和硫酸蛋白多糖高親和結(jié)合的位點(diǎn)。
纖維連接蛋白（英文縮寫FN）是1948年國(guó)外開(kāi)始研究發(fā)現(xiàn)的一種高分子糖蛋白，具有多種生物學(xué)功能。FN廣泛存在于動(dòng)物組織和組織液中，是一種大分子糖蛋白，分子量約為450KD，具有多種生物活性。大量國(guó)內(nèi)外的研究結(jié)果證明，F(xiàn)N分子在進(jìn)化過(guò)程中保守性很強(qiáng)，各種動(dòng)物體液中的FN具有非常相近的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和生物學(xué)功能，因而不同來(lái)源的FN可以相互替代使用。
我國(guó)對(duì)FN的應(yīng)用研究起步較晚，國(guó)內(nèi)纖維連接蛋白（FN）主要從國(guó)外進(jìn)口，我國(guó)的鄭州德福恩生物技術(shù)有限公司對(duì)纖維連接蛋白（FN）進(jìn)行了多年研究，現(xiàn)已取得了纖維連接蛋白（FN）方面的多項(xiàng)國(guó)家發(fā)明。
大鼠纖維連接蛋白(FN)功能
作為生化試劑，為細(xì)胞培養(yǎng)及生物工程的工業(yè)化應(yīng)用提供基礎(chǔ)。FN的很多功能中，zui基本zui重要的一項(xiàng)是促進(jìn)細(xì)胞的黏連生長(zhǎng)，而細(xì)胞的黏連是機(jī)體結(jié)構(gòu)得以維持、細(xì)胞生長(zhǎng)完成的必要條件。因此，F(xiàn)N是細(xì)胞培養(yǎng)基的重要成分之一。鄭州德福恩生物技術(shù)有限公司與中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院共同應(yīng)用豬血漿FN研究結(jié)果表明：FN作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)，可以使多種細(xì)胞的貼壁率達(dá)到90%以上（對(duì)照組為10%），細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)良好，細(xì)胞的代謝率增強(qiáng)，DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成速度提高約5倍，細(xì)胞的集落率升高幾倍，原代培養(yǎng)的成活率明顯提高，細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間縮短，這對(duì)建立人體疾病的體外模型是非常有益的。研究還證明，F(xiàn)N能提高細(xì)胞的融合率，縮短融合周期，可應(yīng)用于許多科研中，如應(yīng)用于細(xì)胞雜交瘤技術(shù)等。將FN涂到微球載體上作為細(xì)胞大量生物試劑的介質(zhì)，可以節(jié)省空間，節(jié)省原材料，成為應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞技術(shù)來(lái)生物試劑新藥品的基礎(chǔ)物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是當(dāng)今生物學(xué)研究中經(jīng)常使用的方法之一，也是生物工程*的手段之一。FN產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，將為細(xì)胞培養(yǎng)的廣泛應(yīng)用及生物工程的應(yīng)用和發(fā)展起到積極的推動(dòng)作用。FN作為生化試劑的使用量將與日俱增，市場(chǎng)潛力很大。FN生化試劑主要由美國(guó)Sigma公司生物試劑（人、牛、鼠血漿FN等），我國(guó)應(yīng)用還主要依賴進(jìn)口。所以，國(guó)內(nèi)開(kāi)發(fā)FN生化試劑是當(dāng)務(wù)之急(鄭州德福恩生物技術(shù)有限公司已開(kāi)發(fā)出FN生化試劑，并已獲得相關(guān)國(guó)家)。
大鼠纖維連接蛋白(FN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。
②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi)，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可地地放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。因此，ELISA檢測(cè)是一項(xiàng)定位、定性和定量(敏感度可達(dá)每毫升ng~pg水平)的綜合技術(shù)。常用的酶是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AKP)。
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