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大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒試劑組成

更新時(shí)間:2017-05-10   點(diǎn)擊次數(shù):954次

大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒基本信息 

腫瘤壞死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)可分為TNF α和TNFβ兩種,前者來(lái)自單核巨噬細(xì)胞,后者由活化T細(xì)胞產(chǎn)生,是具有重要生物活性的細(xì)胞因子。存在于細(xì)胞上的TNF 受體主要有兩種:TNFRⅠ和TNFRⅡ,血清中存在的是可溶性的TNFR(s TNFRⅠ, s TNFRⅡ),它們的相互作用不僅對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有細(xì)胞毒作用,還與炎癥和發(fā)熱反應(yīng)、關(guān)節(jié)炎、敗血癥及多發(fā)性硬化等疾病有密切關(guān)系。

TNF-α是一種單核因子,主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,LPS是較強(qiáng)的刺激劑。IFN-γ、M-CSF、GM-CSF對(duì)單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α有刺激作用,而PGE則有抑制作用。前單核細(xì)胞系U937、前髓細(xì)胞系HL-60在PMA刺激下可產(chǎn)生較高水平的TNF-α。T淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞雜交瘤、T淋巴樣細(xì)胞系以NK細(xì)胞等在PMA刺激下也可分泌TNF-α。SAC、PMA、抗IgM可刺激正常B細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α。此外,中性粒細(xì)胞、LAK、星狀細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞亦可產(chǎn)生TNF-α。

大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒試劑組成

(1)包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):

  Na2CO3 1.59克

  NaHCO3 2.93克

  加蒸餾水至1000ml

 (2)洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M

  KH2PO4 0.2克

  Na2HPO4·12H2O 2.9克

  NaCl 8.0克

  KCl 0.2克

  Tween-20 0.05% 0.5ml

  加蒸餾水至1000ml

?。?)稀釋液:

  牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

  加洗滌緩沖液至100ml

  或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。

 (4)終止液(2M H2SO4):

  蒸餾水178.3ml,逐滴加入硫酸(98%)21.7ml。

?。?)底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):

  0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml

  0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml

  加蒸餾水50ml。

(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:

  TMB(10mg/5ml無(wú)水乙醇)0.5ml

  底物緩沖液(PH5.5) 10ml

  0.75%H2O2 32μl

(7)ABTS使用液:

  ABTS 0.5mg

   底物緩沖液(PH5.5) 1ml

  3%H2O2 2μl

(8)抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。

(9)正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。

elisa試劑盒中有哪些器材

(1) 聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA檢測(cè)儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。

(2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。

(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。

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