小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒太給力了
更新時(shí)間:2017-07-26 點(diǎn)擊次數(shù):1079次小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒基本信息
己糖激酶是六碳糖的磷酸化酶,催化使葡萄糖從穩(wěn)定狀態(tài)變?yōu)榛钴S狀態(tài),活化一個(gè)葡萄糖需要消耗1個(gè)ATP,一個(gè)ATP放出一個(gè)高能磷酸鍵,大約放出30.5kj自由能,大部分變?yōu)闊崃慷⑹?,小部分使磷酸與葡萄糖結(jié)合生成葡萄糖-6-磷酸。
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒的顯色與比色
顯色
顯色是ELISA試驗(yàn)中zui后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。適當(dāng)提高溫度,有助于加速顯色。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無(wú)色,而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。在定量檢測(cè)中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。ELISA顯色結(jié)果通過(guò)酶標(biāo)儀進(jìn)行,可減少實(shí)驗(yàn)誤差,提高臨界值樣本的分析準(zhǔn)確度。盡量避免肉眼直接判斷結(jié)果,因?yàn)椴煌瑐€(gè)體的視覺(jué)存在差異。應(yīng)注意,加顯色劑時(shí),要保持顯色劑不外流。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生較多氣泡,否則可能使假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)概率增加。
比色
比色的方法有目視法和酶標(biāo)比色法2種。目視法簡(jiǎn)單明了,但對(duì)同一標(biāo)本,操作者的不同有時(shí)會(huì)出現(xiàn)不同的結(jié)果,具有一定的主觀性。比色的結(jié)果通常用光密度表達(dá),現(xiàn)按規(guī)定用吸光度表達(dá)。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)的適宜室溫在15℃~30℃之間,使用前要先預(yù)熱儀器15~30min,使測(cè)得結(jié)果更為準(zhǔn)確。比色前,應(yīng)先用潔凈的吸水紙擦拭干凈板底附著的液體,然后將板正確放在酶標(biāo)比色儀的比色架上。綜上所述,的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中,操作者必須熟練掌握基本操作技能,對(duì)每個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格仔細(xì)的核查,盡量避免假陽(yáng)性和假陰性反應(yīng)的出現(xiàn),保證檢測(cè)結(jié)果真實(shí)可靠,為診斷和疾病防治提供可靠的理論依據(jù)。
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