丙二醛含量測試盒真的太棒了!
更新時間:2018-01-05 點擊次數(shù):1272次丙二醛含量測試盒真的太棒了!
測定意義:
氧自由基作用于脂質的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質;后者逐漸分解為一系列復雜的化合
物,其中包括MDA。通過檢測MDA 的水平即可檢測脂質氧化的水平。
測定原理:
MDA 與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產物,在532nm 有zui大吸收
峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質的含量;同時測定600nm 下的吸光度,利用532nm
與600nm 下的吸光度的差值計算MDA 的含量。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、
研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配置:
提取液:液體100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體30mL×1 瓶,4℃保存;
MDA 提取:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量
(104 個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提
取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30 次);
8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,
加入1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測
注意事項:
臨用前注意試劑一是否*溶解,如未溶解,可以70℃-90℃加熱,并振蕩以促進溶解。
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