HRP標(biāo)記羊抗雞IgY如何正確使用
更新時間：2020-05-29 點擊次數(shù)：1107次HRP標(biāo)記羊抗雞IgY如何正確使用
HRP標(biāo)記多克隆抗體是由山羊抗血清經(jīng)親和層析純化而得到高純度多克隆抗體。
一、試劑成分：
HRP* Polyclonal Goat Anti-Chicken Igy(IgG)H+L、50%甘油、PBS、穩(wěn)定劑、保護劑。
二、使用方法：
ELISA法建議在1：4000-20000選擇合適您實驗的稀釋比例，也可根據(jù)您試驗的具體情況在此建議的稀釋度范圍之外合適的使用,高可稀釋到數(shù)萬仍有使用價值。稀釋使用含0.2-0.5%BSA和0.05% 吐溫-20的0.01M的PBS（PH：7.0），也可使用其它正確的稀釋用液，原則上配成的工作液要一次使用完，不得多次使用。如確實要多次使用請在配制時加入合適的防腐劑與穩(wěn)定劑，并要求在2-8℃避光存放，但盡管如此也不要放置太久，以免對您的結(jié)果產(chǎn)生不良影響。因不良稀釋用液和存放而造成的損失不在投訴范圍。本品也可以用于免疫印記和免疫組化實驗。
三、注意事項：
1、雖然本試劑在有效期過后很長一段時間仍可以使用，但還是強烈建議您在管體規(guī)定的有效期內(nèi)正確使用。
2、請不要在臟亂和強光環(huán)境中取用，以免造成污染和失效。
3、如果一次使用很少可以將其適當(dāng)分裝后使用，這樣可以有效的防止試劑污染。
4、本二抗酶對雞其它Ig 有5-10%交叉性，也就是說跟IgM等類抗體也可以有一定反應(yīng)性，實際應(yīng)用良好。
四、批號和有效期：
請查看管體標(biāo)簽。
五、保存條件：
-20℃避光保存。
六、包裝規(guī)格：1ml。
七、產(chǎn)品濃度：1mg/ml
辣根過氧化物標(biāo)記的步驟。
答：1.1 試劑準(zhǔn)備
1) 10mg/mL HRP
2) 0.06mol/L NaIO4
3) 0.16mol/L乙二醇
4) 碳酸鹽緩沖液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸餾水中，調(diào)pH值到9.5)
5) 2.5mg/mL NaBH4
6) 0.01mol/L磷酸鹽緩沖液，pH7.4
1.2 操作步驟
1. 10mg/mL取HRP VmL，溶液為棕黃色，加入0.06mol/L NaIO4 VmL，立刻變?yōu)榛揖G色。靜置30min，4℃
2．加入0.16mol/L乙二醇VmL，溶液變回棕黃色，RT，靜置30min。
3．加入抗體Vml 5mg，CB，4℃透析過夜。
4．再加入5mg/mL NaBH4 VmL，加入后溶液有氣泡產(chǎn)生。室溫靜置2h。
5. 50%飽和硫酸銨鹽析一次，12000rpm，4℃離心30min。沉淀用5VmL 0.01mol/L PB重懸。裝入透析袋。
6. 溶液在0.01mol/L PB，pH7.4中透析過夜。
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