DPPH自由基清除率(檢測(cè)服務(wù))
更新時(shí)間:2024-06-18 點(diǎn)擊次數(shù):349次DPPH自由基清除率(檢測(cè)服務(wù))
服務(wù)介紹:
自由基清除率檢測(cè)試劑盒(比色法)又稱氮自由基清除能力檢測(cè)試劑盒或氮自由基清除率檢測(cè)試劑盒,其檢測(cè)原理是DPPH自由基是一種較穩(wěn)定的含氮自由基,含一個(gè)單電子,溶于乙醇后溶液呈紫色,在517nm下有強(qiáng)吸收,如果有其他物質(zhì)提供一個(gè)電子與此單電子配對(duì),溶液會(huì)褪色,褪色程度與接受電子的量呈正比,通過吸光度下降的程度來反應(yīng)樣品的氮自由基清除能力,主要用于檢測(cè)血清、植物組織、抗氧化類食品、保健品及藥品等樣本。
背景介紹:
DPPH(2,2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基)自由基清除率是一種用于評(píng)估化合物或物質(zhì)抗氧化能力的指標(biāo)。DPPH是一種穩(wěn)定的有機(jī)自由基,在溶液中呈現(xiàn)深紫色,并在517 nm波長處具有最大吸收峰。當(dāng)具有抗氧化性的化合物與DPPH自由基接觸時(shí),它們會(huì)與DPPH發(fā)生氧化還原反應(yīng),導(dǎo)致DPPH的紫色逐漸褪去,即其吸光度降低。
操作步驟(僅供參考):
1、準(zhǔn)備樣品:
①植物樣品:取新鮮植物樣本,清洗干凈,研缽研碎(粉碎),干燥箱烘干后過篩,稱取0.05g樣品,加入0.8ml氮自由基提取液,40℃水浴浸提30~60min,10000rpm離心10min,上清液待用,4℃保存?zhèn)溆?/span>(亦可參考相關(guān)資料提取方法提取)。
②血漿、血清和尿液樣品:血漿(用肝素或枸櫞-酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝) 4℃ 5000rpm離心10min,取上清液待用;血清或尿液樣品可直接測(cè)定。
③細(xì)胞樣品:按每5×106個(gè)細(xì)胞加入0.8ml氮自由基提取液,超聲破碎(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),10000rpm離心10min,取上清液待用。
④果汁、葡萄酒等樣品:按樣品:氮自由基提取液=1:9的比例震蕩混勻,10000rpm離心10min,上清液待用,4℃保存?zhèn)溆谩?/span>
⑤ 高活性樣品:如果樣品中有效濃度較高,可用提取液進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>
2、配制維生素C溶液:將一支10mg維生素C充分溶解于1ml氮自由基提取液中
3、配制Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液:如需測(cè)線性關(guān)系,建議用氮自由基提取液將10mg/ml維生素C溶液稀釋至20、15、10、8、6、4、2μg/ml的Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液
4、 分光光度計(jì)開機(jī)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長517nm(500~530nm亦可),無水乙醇調(diào)零。
5、DPPH加樣:按照下表設(shè)置空白管、樣本測(cè)定管、樣本對(duì)照管、陽性對(duì)照管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,混勻,室溫避光靜置30min。
加入物(ml) | 空白管 | 樣本測(cè)定管 | 樣本對(duì)照管 | 陽性對(duì)照管(標(biāo)準(zhǔn)管) |
氮自由基提取液 | 0.2 | — | — | — |
上清液 | — | 0.2 | 0.2 | — |
Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液 | — | — | — | 0.2 |
無水乙醇 | 0.9 | 0.9 | 1.8 | 0.9 |
DPPH溶液 | 0.9 | 0.9 | — | 0.9 |
6、 OD值測(cè)定:將各管溶液依次加入到比色皿中,用分光光度計(jì)檢測(cè)各管吸光度值,依次記為A0、A1、A2、A3。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣須知:
1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù),提前一天聯(lián)系
2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求,密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸
3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請(qǐng)務(wù)必提前告知
4.測(cè)試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告后,樣本可以保留1個(gè)月,若需保留樣本或者回收樣本請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>
備注:本公司對(duì)客戶的項(xiàng)目的專有技術(shù)和資料(包括實(shí)驗(yàn)方案,測(cè)試結(jié)果,樣本等)負(fù)有絕對(duì)保密的責(zé)任。
僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不走其他用途!