海藻糖酶測定試劑盒 生化試劑
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海藻糖酶測定試劑盒，THL廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供應(yīng)。
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海藻糖酶測定試劑盒
（Trehalase，THL; 分光光度法 50T/24 樣）
一、測定意義：
THL廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。
海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而
直接用于能量供應(yīng)。
二、測定原理：
THL 催化海藻糖產(chǎn)生葡萄糖，經(jīng)葡萄糖氧化酶作用
生成葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化物酶催化過氧化氫跟
4-氨基安-替比林偶聯(lián)酚反應(yīng)生成顯色物，在 505nm 處測
定其吸光度值，反映 THL 的酶活性。
三、需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃
比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
四、試劑的組成和配制：
提取液：液體25mL×1瓶，4°C保存；
試劑一：液體10mL×1瓶，4°C保存；
試劑二：液體25mL×1瓶，4°C保存；
試劑三：液體25mL×1瓶，4°C保存。如果出現(xiàn)結(jié)冰現(xiàn)象可
以37溫浴溶解后使用。
工作液：試劑二和試劑三等比例混合，需要多少配多少，
現(xiàn)配現(xiàn)用。
五、測定步驟：
1、樣本前處理：
（1）細(xì)菌或細(xì)胞樣本：
收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管中，離心后棄上清；按照
細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（萬）和提取液體積（mL）500-1000:1
的比例（建議 500 萬中加入 1mL 提取液），超聲破碎（冰
浴，功率 20%或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）
后，8000g，4°C 下離心 10min，取上清放置在冰上待測。
（2）組織樣本：
按照組織質(zhì)量（g）和提取液體積（mL）1:5-10 的比
例（建議稱取 0.1g 組織加入 1mL 提取液），冰浴中勻漿。
8000g，4°C 離心 10min 后取上清放置在冰上待測。
（3）血清（漿）樣本：
按照血清（漿）和提取液比例 1:5-10 的比例（建議
0.1mL 血清加入 1mL 提取液），冰浴中勻漿后 8000g，4°C
離心 10min 取上清放置在冰上待測。
海藻糖酶測定試劑盒
