谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒 生化試劑
- 型 號(hào):
- 參考價(jià):0~0
谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒,二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應(yīng)時(shí)能產(chǎn)生一種黃色化合物,可進(jìn)行比色定量測(cè)定。
谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒
(比色法)
一、測(cè)定原理:
二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應(yīng)時(shí)能產(chǎn)生一種黃色化合物,可進(jìn)行比色定量測(cè)定。
二、試劑組成與配制:(100T/96 樣)
試劑一:甲粉×1 瓶,乙液 50ml×1 瓶,4℃保存 6 個(gè)月。甲粉:加 90~100℃的熱雙蒸水 170ml,
充分溶解;
試劑一應(yīng)用液的配制:將已配好的甲液與乙液充分混合。此為過(guò)飽和溶液,室溫靜置冷卻后,如
有結(jié)晶,則取上清進(jìn)行實(shí)驗(yàn),室溫保存 6 個(gè)月。
試劑二:粉劑×1 瓶,用時(shí)加雙蒸水至 200ml 溶解,用我所贈(zèng)送的塑料瓶室溫保存 6 個(gè)月。
試劑三:粉劑×1 支,用時(shí)加雙蒸水至 50ml 溶解,避光 4℃保存 6 個(gè)月。
試劑四:粉劑×4 支,用時(shí)每支加雙蒸水 10ml 溶解,避光冷藏可保存 5 天。
試劑五:GSH 標(biāo)準(zhǔn)品粉劑 3.07mg×3 支,4℃保存 6 個(gè)月。
試劑六:GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑貯備液 10ml×1 瓶,4℃保存 6 個(gè)月。
GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑應(yīng)用液的配制:按 GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑貯備液:雙蒸水=1:9,加入 9 倍體積的雙
蒸水進(jìn)行稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。
1mmol/L GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制:GSH 的分子量為 307,每次測(cè)定前將 3.07mg 的 GSH 標(biāo)
準(zhǔn)品加入到 10ml 的 GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑應(yīng)用液中,混勻,
現(xiàn)用現(xiàn)配。
20μmol/L GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制:取 1mmol/LGSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶液 0.2ml 加入 GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶
劑應(yīng)用液 9.8ml, 現(xiàn)用現(xiàn)配。
四、注意事項(xiàng):
1、血液中的 GSH 幾乎全部存在于紅細(xì)胞內(nèi),可以用每升全血中 GSH 的克數(shù)來(lái)表示,也可用
每克 Hb 中 GSH 的含量來(lái)表示。
2、計(jì)算時(shí)應(yīng)用消光系數(shù),故比色計(jì)要校正波長(zhǎng)。用標(biāo)準(zhǔn)管計(jì)算較方便、準(zhǔn)確。
3、吸取上清時(shí),用帶刻度的 5ml 滴管,或者用移液器,避開(kāi)表面的一層薄膜,插到上清
液中吸取 2ml 做顯色反應(yīng)。
4、每批試驗(yàn)做 2 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管、空白管,以減少操作誤差。
五、測(cè)定意義:
谷-胱甘肽(GSH)是一種低分子清除劑,它可清除 O2 -、H2O2、LOOH。谷-胱甘肽是谷
氨酸、甘-氨酸和半胱-氨酸組成的一種三肽,是組織中主要的非蛋白質(zhì)的巰基化合物,并且是
GSH—PX 和 GST 兩種酶類的底物,為這二種酶分解氫過(guò)氧化物所必需,它并且能穩(wěn)定含巰
基的酶和防止血紅蛋白及其它輔因子受氧化損傷,最近還證明 GSH 也參與使維生素 E 恢復(fù)
到還原態(tài)的作用,缺乏或耗竭 GSH 會(huì)促使許多化學(xué)物質(zhì)或環(huán)境因素產(chǎn)生中毒作用或加重其
中毒作用,這可能與增加氧化損傷有關(guān),因而 GSH 的量的多少是衡量機(jī)體抗氧化能力大小
的重要因素。
谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒