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紅細(xì)胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理
正常血紅蛋白是亞鐵血紅蛋白,可被氧化成為高鐵血紅蛋白,當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)G-6-PD含量正常時(shí),通過(guò)戊糖代謝旁路形成的 NADPH可作為血液中高鐵血紅蛋白還原酶的輔酶,并在遞氫體的參與下,高鐵血紅蛋白還原為亞鐵血紅蛋白。當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)缺少G6-PD時(shí),高鐵血紅蛋白不能被還原,通過(guò)測(cè)定高鐵血紅蛋白的吸光度,可算出G-6-PD的活力高低。

葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測(cè)定是研究葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的主要方法，當(dāng)其測(cè)定結(jié)果低于正常時(shí)，常作為數(shù)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的研究依據(jù)。通過(guò)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的測(cè)定，對(duì)于研究藥物試驗(yàn)引起的溶血性貧血具有*的科研價(jià)值。
正常血紅蛋白是亞鐵血紅蛋白，可被氧化成為高鐵血紅蛋白，當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)G-6-PD含量正常時(shí)，通過(guò)戊糖代謝旁路形成的NADPH可作為血液中高鐵血紅蛋白還原酶的輔酶，并在遞氫體的參與下，高鐵血紅蛋白還原為亞鐵血紅蛋白。當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)缺少G-6-PD時(shí)，高鐵血紅蛋白不能被還原，通過(guò)測(cè)定高鐵血紅蛋白的吸光度，可算出G-6-PD的活力高低。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
2、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.3%。
3、回收試驗(yàn)： X =102%。
4、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

 所需儀器及自備試劑：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為640nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

樣本收集與前處理：
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。

操作流程：
1、按步驟加入樣本和R1、R2
2、漩渦混勻，加塞37℃孵育3小時(shí)
3、取以上混合液50l，加入R3， 3000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘
4、取上清，550nm波長(zhǎng)，1cm光徑，比色
紅細(xì)胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）實(shí)驗(yàn)代測(cè)