超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測(cè)
- 型 號(hào):ATP
- 參考價(jià):25~25
ATP酶可分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷,測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量可判斷ATP酶活力的高低。超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測(cè)
所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測(cè)
測(cè)定原理:ATP酶可分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷,測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量可判斷ATP酶活力的高低。
ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,它在物質(zhì)運(yùn)送、能量轉(zhuǎn)換以及信息傳遞方面具有重要的作用,機(jī)體在缺氧及一些疾病狀態(tài)下,此酶活力發(fā)生一系列改變,另外有些遺傳疾病也與此酶活力有關(guān)。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無(wú)損傷的重要指標(biāo)。
ATP酶又稱(chēng)為三磷酸腺苷酶,是一類(lèi)能將三磷酸腺苷(ATP)催化水解為二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根離子的酶,這是一個(gè)釋放能量的反應(yīng)。在大多數(shù)情況下,能量可以通過(guò)傳遞而被用于驅(qū)動(dòng)另一個(gè)需要能量的化學(xué)反應(yīng)。這一過(guò)程被所有已知的生命形式廣泛利用。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取樣本量100ul。
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn): X =103.3%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物組織、紅細(xì)胞以及各種培養(yǎng)細(xì)胞、各種水產(chǎn)等,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為636nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。
操作流程:
1、酶促反應(yīng):按說(shuō)明操作加入樣本100l和混合試劑,37℃準(zhǔn)確反應(yīng)10分鐘
2、加R4,3500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清
3、定磷:取上清液加入顯色劑,室溫靜置2分鐘加R6
4、室溫靜置5分鐘636nm波長(zhǎng),1cm光徑,比色
超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測(cè)