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抗壞血酸過氧化物酶(APX)實(shí)驗(yàn)代測(cè)

  • 型   號(hào):(APX)
  • 參考價(jià):25~25

APX是抗壞血酸過氧化物酶的英文簡(jiǎn)稱。是植物活性氧代謝中重要的抗氧化酶之一,尤其是葉綠體中清除H2O2的關(guān)鍵酶,又是維生素C代謝的主要酶類。
抗壞血酸過氧化物酶(APX)實(shí)驗(yàn)代測(cè)

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抗壞血酸過氧化物酶(APX)實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理:抗壞血酸過氧化物酶(APX)催化抗壞血酸(ASA)與過氧化氫反應(yīng),使ASA氧化成單脫氫抗壞血酸(MDASA)、隨著ASA被氧化,溶液中290nm波長(zhǎng)下的吸光度值(A290)減少值,計(jì)算抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性。ASA氧化量按消光系數(shù)2.8(mol/ml)cm計(jì)算。
APX是抗壞血酸過氧化物酶的英文簡(jiǎn)稱。是植物活性氧代謝中重要的抗氧化酶之一,尤其是葉綠體中清除H2O2的關(guān)鍵酶,又是維生素C代謝的主要酶類。H2O2是植物葉綠體中光合電子傳遞鏈和某些酶反應(yīng)的天然產(chǎn)物,是具有毒害作用的活性氧。可催化植物葉中維生素C的氧化還原,由兩種同工酶組成:其一為單聚體,相對(duì)分子質(zhì)量34 000,含血紅素,不含糖蛋白。兩種同工酶的分子量對(duì)基質(zhì)的消耗、對(duì)電子供體的專一性和其他酶學(xué)性質(zhì),均不相同。該酶在氧化、還原態(tài)時(shí),出現(xiàn)不同波長(zhǎng)的索端氏峰;添加CN_或抗壞血酸耗盡時(shí),索端氏峰改變。已將該酶純化,并測(cè)定了它們的氨基酸排列順序,在植物葉中催化抗壞血酸的氧化。
植物中的APX:
APX是一種亞鐵血紅素蛋白,植物的APX存在著多種同工酶,且位于細(xì)胞中不同區(qū)域。一種為位于葉綠體中并分解葉綠體中的H2O2的葉綠體型同工酶;另一種為位于葉綠體之外的其它細(xì)胞組分的細(xì)胞質(zhì)型同工酶。
這兩種同工酶具有共同的特點(diǎn),但也有不同的方面:①胞質(zhì)型同工酶APX占總APX的40%以上;②葉綠體型APX對(duì)AsA的專一性比胞質(zhì)型APX更強(qiáng);③在不含AsA的介質(zhì)中,葉綠體型同工酶比細(xì)胞質(zhì)型同工酶更快喪失活性;④葉綠體型同工酶對(duì)琉基試劑和經(jīng)基脈、對(duì)氨基苯酚等抑制劑較胞質(zhì)型同工酶更為敏感;⑤二者的分子量不同。

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