紅細(xì)胞內(nèi)原蟲(瘧原蟲)染色液

[儲存條件及有效期]

本試劑盒應(yīng)置室溫密封保存，有效期一年。

[涂片及染色的操作步驟]

1、血涂片厚片的制作及染色

①　血涂片厚片制作

取全血 4 微升左右(1/4 火柴頭大小) 置干凈的載玻片上，用推玻片一角由內(nèi)向外同一方向勻速畫圈涂均，大小約 1cm?，血膜不宜過厚，一般約 3 層紅細(xì)胞左右，室溫晾干。

②　血涂片的厚片染色

a、將已晾干的厚的血涂片平置于染色架上，滴加前處理試劑 3~5 滴，使其迅速蓋滿厚血膜，溶血 30 秒左右(20~40 秒)，倒丟(不要沖洗)

b、滴加姬民試劑一3~5 滴，使其迅速蓋滿厚血膜，染色 40 秒左右(30~60 秒)，以固定并染色厚血膜。

C、不要倒丟姬氏試劑一，直接滴加姬氏試劑二6~10 滴(民試一的2 倍量)，輕搖玻片或用洗耳球?qū)?zhǔn)血涂片吹氣使染液充分混合，染色 2~3 分鐘，倒丟染色液并立即水洗 30 秒，待干后油鏡鏡檢 (可封片鏡檢也可滴香柏油鏡檢)。

2、血涂片薄片的制作及染色

①　血涂片的薄片制作

取全血 2 微升左右置干凈的載玻片上，將推玻片保持與載玻片 30 度角，置于血滴正前方，稍往后移與血滴接觸，即可見血液沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動，至血液鋪完血膜為止，室溫晾干。

②　血涂片的薄片染色

a、將已晾干的薄的血涂片平置于染色架上，滴加姬氏試劑一3~5 滴，使其迅速蓋滿薄血膜，染色 1分鐘左右，以固定并染色薄血膜。

b、不要倒丟姬氏試劑一，直接滴加姬氏試劑二 6~10 滴，輕搖玻片或用洗耳球?qū)?zhǔn)血涂片吹氣使染液充分混合，染色 5~8 分鐘。

c、水洗 30 秒，待干后鏡檢。

3、同一張載玻片上厚、薄血片的制作及染色

①　同一張載玻片上厚、薄血片的制作

取全血 2 微升左右，置于載玻片的右前方，將推玻片保持與載玻片 30 度角，稍往后移與血滴接觸，即可見血液沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向左滑動，至血液鋪完血膜為止(注意:不要超過玻片的 /3):仍在此張玻片的左半邊的中心滴全血 4 微升左右(1/4 火柴頭大小)用推玻片一角由內(nèi)向外同一方向勻速畫圈涂均,大小約 1cm?，血膜不宜過厚，一般約 3 層紅細(xì)胞左右，室溫晾干。

②　厚、薄血涂片同時(shí)染色

a、將已晾干的涂在同一張載玻片上的厚、薄血涂片平置于染色架上，在厚血片部分滴加前處理試劑3~5 滴(注意: 不可滴在薄血片部分)，溶血 30 秒左右(20~40 秒)倒丟(不要沖洗)。注意: 只溶厚血膜，不溶薄血膜。

b、滴加姬氏試劑一 5~6 滴，使其迅速蓋滿厚、薄血膜，染色 40 秒左右(30~60 秒),以固定并染色厚、薄血膜。

C、不要倒丟姬氏試劑一，直接滴加姬氏試劑二 10~12 滴(是氏試劑一的2 倍量),C輕搖玻片或用洗耳球?qū)?zhǔn)血涂片吹氣使染液充分混合，厚、薄血膜染色 2~3 分鐘倒丟染色液并立即水洗 30 秒，待干后油鏡鏡檢(可封片鏡檢也可滴香柏油鏡檢)

染色結(jié)果

被瘧原蟲感染的紅細(xì)胞保留殘影，呈淡紅色，尤其是在晚期滋養(yǎng)體及裂殖體感染的紅細(xì)胞殘影更為明顯，其它紅細(xì)胞多被溶解。瘧原蟲染色清晰，其形態(tài)基本不變，原蟲細(xì)胞核呈紫紅色，細(xì)胞漿呈淡藍(lán)色，瘧色素呈棕色或褐色，空泡不著色或著色即淡，區(qū)分清楚,容易鑒別，此片亦可長期保存。

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