谷-胱甘肽還原酶活性系數(shù)測試盒

（GRAC 100T/48 樣）

一、試劑組成及配制：

試劑一：緩沖液，32mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：底物貯備液，0.22mL×1 瓶，-20℃避光保存。

底物稀釋液，2.2 mL×1 瓶，-20℃保存。

底物應(yīng)用液的配制：臨用前按底物貯備液：底物稀釋液=1:9

的比例 10 倍稀釋，制備成底物應(yīng)用液，用不完的

應(yīng)用液三天內(nèi) 4℃保存，三天以上-20℃保存。

試劑三：基質(zhì)粉劑×2 支，-20℃避光保存。

基質(zhì)稀釋液，2.5mL×2 瓶，-20℃保存。

基質(zhì)應(yīng)用液的配制：臨用前將 1 支基質(zhì)粉劑加入到 1 瓶基質(zhì)

稀釋液中充分溶解，制備成基質(zhì)應(yīng)用液，用不完

的應(yīng)用液三天內(nèi) 4℃保存，三天以上-20℃保存。

試劑四：促進(jìn)劑粉劑×2 支，-20℃避光保存。

促進(jìn)劑稀釋液，1.3mL×2 瓶，-20℃保存。

促進(jìn)劑應(yīng)用液配制：臨用前將 1 支促進(jìn)劑粉劑加入到 1 瓶促

進(jìn)劑稀釋液中充分溶解，制備成促進(jìn)劑應(yīng)用液，用

不完的應(yīng)用液三天內(nèi) 4℃保存，三天以上-20℃保

存。

試劑五：沉淀劑，40mL×2 瓶，4℃保存。

試劑六：顯色劑粉劑×2 支，4℃避光保存。

顯色劑稀釋液，50mL×2 瓶， 4℃避光保存。

顯色劑應(yīng)用液的配制：臨用前將 1 支顯色劑粉劑加入到 1

瓶顯色劑稀釋液中充分溶解，制備成顯色劑應(yīng)用

液，4℃避光保存。

四、測定原理：

谷-胱甘肽還原酶（GR）在有還原型輔酶Ⅱ存在的條件

下，可催化氧化型谷-胱甘肽（GSSG）還原為還原型谷胱甘

肽（GSH），該酶的輔基為黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）。因

此, 當(dāng)核黃素缺乏而導(dǎo)致FAD不足時, 則可使此酶的活性下

降。通過測定谷-胱甘肽還原酶活性系數(shù)來評價機(jī)體核黃素的

營養(yǎng)狀況。

五、檢測意義：

核黃素在體內(nèi)以FAD的形式與酶蛋白結(jié)合成各種黃素

蛋白, 作為電子轉(zhuǎn)移系統(tǒng)參與氧化還原過程。核黃素缺乏時,

產(chǎn)生皮膚、粘膜和眼部等一系列的癥狀。為了早期發(fā)現(xiàn)核黃

素缺乏, 及時采取防治措施, 有必要進(jìn)行核黃素營養(yǎng)狀況的

評定。

核黃素缺乏時, 谷-胱甘肽活性系數(shù)迅速增高, 而補(bǔ)充核

黃素后就降為正常。故谷-胱甘肽還原酶活性系數(shù)

（Glutathione Reductase Activation Coefficient, GRAC）是評

定核黃素慢性缺乏時體內(nèi)核黃素總水平的準(zhǔn)確指標(biāo)。應(yīng)用谷

胱甘肽還原酶活性系數(shù)（GRAC）的值評價核黃素營養(yǎng)狀況

具有靈敏、穩(wěn)定、準(zhǔn)確、微量、能反映體內(nèi)代謝利用情況等

優(yōu)點。

附錄 I：全血中谷-胱甘肽還原酶活性系數(shù)的測定

一、樣本前處理：

取新鮮全血樣本 10μL 加入雙蒸水 990μL，漩渦混勻 1

分鐘使溶血，制備成 100 倍稀釋的溶血液按前 Ian 的操作表

加樣。（對光看一下是否透亮，若不透亮，有渾濁，則 4000

轉(zhuǎn)/分，離心 5 分鐘，取上清液測定即可）

附錄Ⅱ：血清中谷-胱甘肽還原酶活性系數(shù)的測定

一、樣本前處理：

取血清樣本 200μL 加入 600μl 生理鹽水，即按 1:3 進(jìn)行

稀釋后按操作表加樣。

附錄Ⅲ：組織中谷-胱甘肽還原酶活性系數(shù)的測定

一、樣本前處理：

準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量（g）:體積（mL）=1:9 的比

例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水條件下制備成 10%的組

織勻漿，3500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液，再用生理鹽

水 5 倍稀釋后制備成 2%組織上清液按操作表加樣。

 谷-胱甘肽還原酶活性系數(shù)測試盒