糜-蛋白酶測試盒 生化試劑
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糜-蛋白酶測試盒 ,又稱胰-凝乳蛋白酶(Chymotrypsin),系從?;蜇i胰中提取的一種蛋白水解酶,具有肽鏈內(nèi)切酶的作用,通過切斷蛋白質(zhì)肽鏈中酪-氨酸、苯丙-氨酸的羧端肽鏈作用,專一水解羧端芳香族氨基酸(酪-氨酸、色-氨酸、亮-氨酸)或側(cè)鍵大體積疏水性殘基甲-硫氨酸等。
糜-蛋白酶測試盒
一、測定意義:
糜-蛋白酶又稱胰-凝乳蛋白酶(Chymotrypsin),系從?;蜇i胰中提取的一種蛋白水解酶,具有肽鏈內(nèi)切酶的作用,通過切斷蛋白質(zhì)肽鏈中酪-氨酸、苯丙-氨酸的羧端肽鏈作用,專一水解羧端芳香族氨基酸(酪-氨酸、色-氨酸、亮-氨酸)或側(cè)鍵大體積疏水性殘基甲-硫氨酸等。可以分解炎癥部位纖維蛋白的凝結(jié)物,促進血凝塊、膿性分泌物及壞死組織的溶化分解,從而凈化創(chuàng)面,使肉芽組織新生,促進傷口愈合。其在眼科、皮膚科做臨床局部應用已被肯定,也可用于創(chuàng)口或局部炎癥,以減少局部分泌和水腫。近年來隨著臨床藥理學研究的不斷發(fā)展.其臨床應用范圍也日漸廣泛。
二、測定原理:
以酪蛋白為底物,糜-蛋白酶可水解蛋白產(chǎn)生含酚的氨基酸,而酚試劑可被含酚的氨基酸還原成藍色物質(zhì),通過比色可測定糜-蛋白酶活力。
三、試劑盒組成與配制:(50 管/24 樣)
試劑一:液體 24mL×1 瓶,4℃保存 3 個月。
試劑二:液體 6mL×2 瓶,4℃保存 1 個月。
試劑三:液體 100mL×1 瓶,4℃保存 3 個月。
試劑四:液體 9mL×2 瓶, 4℃避光保存 2 個月。
試劑五:1mg/mL 酪-氨酸標準品貯備液 1mL×1 瓶,標準品稀釋液 20mL×1 瓶,4℃保存 1 個月。
50μg/mL 標準應用液的配制:取 1mg/mL 標準品貯備液 50μL 用標準品稀釋液稀釋至 1mL,即 1︰19(體積比)稀釋,充分混勻后,4℃可保存 10 天以上。
試劑六:勻漿介質(zhì) 60mL×2 瓶,4℃保存 1 個月。
四、操作步驟:
1、樣本前處理:、
組織樣本:準確稱取組織重量,按重量(g):體積(mL)=1:9 的比例,加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì),冰水浴條件下機械勻漿,制成 10%的組織勻漿,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清液進行預試后根據(jù)活力大小或直接進行檢測或用勻漿介質(zhì)進行適當稀釋后測定。(預試結(jié)果請參考附錄中的標準曲線)
2、樣本及試劑在測試前均要平衡至室溫(室溫在 20℃以上可放置室溫;室溫在 20℃以下,可將試劑置于 37℃水浴中預溫 10 分鐘)。
糜-蛋白酶測試盒